Cómo usar microtomo rotativo

Se utiliza un microtomo rotativo para preparar secciones de tejido para el examen y el diagnóstico patológicos. Cortar secciones de parafina de alta calidad requiere una amplia habilidad y experiencia. El uso adecuado del instrumento garantiza la precisión, la seguridad y la alta calidad de las muestras. Esta guía proporciona instrucciones paso a paso para ayudar a los usuarios a operar efectivamente el microtomo rotativo, ya sea para la histología de rutina o las aplicaciones de investigación.

¿Qué es un microtomo giratorio?

La seccionamiento de parafina es la técnica de preparación más común en histología. Su aplicación no se limita a observar la morfología y la estructura de las células normales, pero también es el método principal utilizado en patología y medicina forense para estudiar, observar y determinar los cambios en la morfología del tejido celular. La seccionamiento de parafina también se usa ampliamente en otros campos de investigación científica. El microtomo rotativo es una herramienta auxiliar de uso común para la incrustación de parafina en patología.

Aplicaciones principales de microtomas rotativos

1. Laboratorios: se utiliza para observar la estructura morfológica de los tejidos de células animales y vegetales normales.

2. Laboratorios clínicos: se utiliza para observar la estructura morfológica de los tejidos de células animales y vegetales normales.

3. Universidades y centros de investigación biológica: se utiliza para estudiar, observar y determinar los cambios morfológicos en los tejidos celulares.

4. Empresas farmacéuticas y laboratorios médicos: utilizado para inmunohistoquímica, inmunofluorescencia, secuenciación del genoma, etc.

Tipo de microtomo

Microtomo rotativo

Características:

1. Equipado con un soporte de cuchilla

2. Solo se puede instalar una cuchilla a la vez para recortar y seccionar

Ventajas: permite un corte continuo, particularmente adecuado para biopsias, incluidas muestras de biopsia de agujas

Microtomo deslizante

Características:

1. Durante el recorte, la cuchilla se desliza con la muestra; Durante la seccionamiento, la muestra permanece estacionaria mientras la cuchilla se desliza.

2. Puede instalar dos cuchillas para recortar y seccionar.

Ventajas:

1. Ahorra tiempo al cortar bloques de tejido grandes.

2. Puede instalar dos cuchillas simultáneamente para recortar y seccionar, ahorrando en el uso de cuchillas.

3. Se utiliza principalmente para la investigación sobre tejidos grandes y la observación de tejidos múltiples.

Desventajas:

1. Solo puede cortar una vez por sesión.

2. Requiere la instalación de un purificador de aire; Eliminar la electricidad estática aumenta los costos.

3. No es adecuado para secciones de tejido pequeño, incluidas biopsias endoscópicas.

4. Cortar los tejidos pequeños lleva mucho tiempo y ralentiza la velocidad de seccionamiento.

Microtomo vibratorio

Características:

1. Corta el tejido fresco sin fijación o refrigeración.

2. Corta secciones más gruesas: 20–100 μm

Ventajas:

1. Las sustancias y los antígenos superficiales solubles en lípidos en el tejido se conservan mejor que en muestras de tejido no congelados, no forman cristales y no causan ningún daño a los antígenos en la muestra de tejido.

2. Se utiliza principalmente para demostrar la distribución de anticuerpos en el sistema nervioso, particularmente adecuado para la observación de la microscopía electrónica inmun.

Tipos de microtomas rotativos

Microtomo rotativo manual:

Operación de rotación del volante. El uso a largo plazo del engranaje motor puede causar desgaste, afectando la precisión de la inyección y provocar una pantalla de datos insuficiente, pero es relativamente de bajo costo.

Microtomo rotativo semiautomático:

Semiautomado, equipado con una perilla de inyección o panel de control externo.

El sistema de inyección eléctrica garantiza la precisión de la inyección. La máquina tiene una vida útil más larga, proporciona una pantalla de datos más completa y se alinea mejor con los escenarios clínicos.

Microtomo giratorio automático:

Funcionalidad de corte completamente automática, equipada con una perilla de inyección o panel de control externo, totalmente automatizado.

Microtomo de criostato:

Su tecnología criogénica permite que las muestras se procesen rápidamente, reduciendo el impacto de la fijación química en el tejido. Típicamente operado entre -20 ° C y -30 ° C para preservar la integridad estructural y la morfología celular de las muestras de tejido.

Componentes y funciones de microtomo rotativos

Componentes principales para la operación diaria de microtomas rotativos:

Inyección:

El sistema de inyección de alta precisión utiliza componentes clave como rodamientos de rodillos cruzados, husillos, motores paso a paso y bielas para garantizar la calidad de seccionamiento estable y cumplir con los requisitos de precisión de inyección de 0.5 μm.

Fijación:

El puntero visual presenta escamas marcadas en el cabezal de la muestra, que soportan ajustes reversibles en tiempo real, particularmente adecuados para tejidos más gruesos o secciones integradas preparadas en ángulos de corte especiales.

Corte:

El codificador de alta precisión recibe rápidamente señales de corte automáticas, y al finalizar el corte, el freno digital se activa automáticamente para asegurar la rueda a mano, mejorando la seguridad.

Seguridad:

El sistema de ruedas a mano incorpora un mecanismo de doble bloqueo: bloqueo y bloqueo de rueda; El dispositivo de retracción proporciona protección del usuario.

Cómo usar un microtomo rotativo

I. secciones semicolientes

1. Conecte la fuente de alimentación y encienda el interruptor principal;

2. Seleccione el grosor de la sección: el rango de espesor de sección típico es 0.25-100 μm. Use los botones '+' y '-' para ajustar el valor de grosor, con la unidad siendo μm;

3. Coloque el bloque integrado en el centro de la cabeza de seccionamiento, apriete el tornillo de bloqueo y asegure la muestra según sea necesario;

4. Instale la cuchilla de vidrio con la bandeja de agua (asegúrese de que la rueda de mano esté bloqueada antes de instalar la cuchilla) y alinee el borde de la cuchilla con la muestra;

5. Seleccione el modo de seccionamiento: seccionamiento automático o manual. Después de seleccionar el modo, el instrumento vuelve a cero y comienza el conteo de sección;

6. Recoge las secciones: use un anillo de recuperación de sección para recuperar las secciones delgadas que flotan en agua y unirlas a un portaobjetos. Secia a 40–60 ° C, tinte con TBO, lavado y monte con glicerol al 50% para observación y fotografía.

II. Secciones de parafina

1. Conecte la fuente de alimentación y encienda el interruptor principal;

2. Seleccione el grosor de la sección: ajuste el valor de grosor usando los botones '+' y '-', unidad: μm;

3. Coloque el bloque integrado preparado en el centro de la cabeza de seccionamiento, gire el tornillo de fijación y asegure la muestra de acuerdo con los requisitos;

4. Instale el soporte de la cuchilla, inserte una cuchilla desechable, una cuchilla de acero de tungsteno o una cuchilla de acero de corte estándar (asegúrese de que la rueda de mano esté bloqueada antes de instalar la cuchilla) y alinee el borde de la cuchilla con la muestra;

5. Seleccione el modo de corte: corte automático o corte manual; Después de seleccionar el modo de corte, el instrumento vuelve a cero y comienza el recuento de corte;

6. Recoge el material en rodajas: use un cepillo para levantar la tira de cera y colóquelo en la caja de tiras de cera;

7. Montaje: use un cuchillo de punta redondeada para cortar la tira de cera, seleccione el material intacto y colóquelo sobre un portaobjetos recubierto con aceite de clara de huevo (agregue agua destilada al aceite de clara de huevo para mantener el material flotando en la superficie);

8. Secado: en un banco de secado de calefacción eléctrica, una vez que el material esté plano, coloque el portaobjetos en una bandeja de propagación y seca en un horno de temperatura constante de 36 ° C durante aproximadamente cuatro días o en una máquina de secado de 60 ° C durante dos horas;

9. Retirado, tinción y montaje: desplegue el material con xileno, luego mancha de acuerdo con el propósito experimental. Monte y seque el material con resina neutra o resina canadiense.

10 consejos para mejorar la calidad de la sección

Mantenga la cuchilla afilada: reemplace o afire regularmente la cuchilla para garantizar la nitidez y reducir el daño de la sección.

Ajuste la velocidad de corte: ajuste la velocidad de corte de acuerdo con el tipo de muestra para evitar secciones desiguales causadas por una velocidad excesiva.

Mantenga la muestra fría: use un sistema de enfriamiento o cubitos de hielo para mantener una temperatura baja para la muestra y reducir la deformación del tejido.

Asegúrese de que la tabla de corte esté nivelada: asegúrese de que la tabla de microtomo esté nivelada para evitar rodajas sesgadas causadas por ángulos de corte incorrectos.

Limpie el equipo: limpie regularmente el microtomo para evitar que el polvo o los residuos afecten la calidad de la rebanada.

Ajuste el grosor de la rebanada: ajuste el grosor de la rebanada según sea necesario para evitar rodajas que sean demasiado gruesas o demasiado delgadas.

Verifique la fijación de la muestra: asegúrese de que la muestra esté fija de forma segura para evitar el aflojamiento durante el corte.

Use el medio de corte apropiado: seleccione un medio de corte apropiado para mejorar la planitud de las rebanadas.

Evite el corte excesivo: evite el corte continuo prolongado para evitar daños en la muestra o sobrecalentamiento de cuchillas.

Calibre regularmente el equipo: calibre regularmente el microtomo para garantizar su precisión y estabilidad.

Consejos de mantenimiento del microtomo rotativo

1. No use objetos duros o afilados para raspar la máquina;

2. Limpie la superficie con agua limpia, no agentes químicos;

3. Evite sacudir o golpear la máquina durante la operación;

4. Apriete todos los tornillos en la máquina utilizando las herramientas proporcionadas cada dos meses;

5. Si la máquina no se usará durante un período prolongado, desenchufe el cable de alimentación, almacene el equipo correctamente y cubra los componentes de imágenes ópticas con un paño para evitar la acumulación de polvo.

Conclusión

En conclusión, dominar el uso de un microtomo rotativo es esencial para lograr secciones de tejido de alta calidad en diversas aplicaciones de laboratorio. Al seguir los procedimientos operativos adecuados, realizar un mantenimiento regular y garantizar la configuración correcta, puede mejorar tanto la precisión como la longevidad de su equipo. Con la práctica, podrá producir resultados constantes y confiables para su análisis histológico.