Un error puede arruinar su muestra de plasma: consejos para la preparación, el almacenamiento y la descongelación

El plasma tiene una amplia gama de aplicaciones y es indispensable en transfusiones de sangre y tratamientos clínicos. Para garantizar un uso seguro, el plasma y otros componentes sanguíneos deben someterse a pruebas rigurosas y almacenarse adecuadamente en bancos de sangre. Por lo tanto, las instituciones médicas de todo el país están equipadas con sofisticados equipos de almacenamiento y descongelación de sangre, como congeladores, refrigeradores y descongeladores de plasma especializados. Este equipo se utiliza para mantener con precisión las temperaturas de refrigeración, proteger eficazmente los componentes sanguíneos, evitar su degradación y prepararlos para su posterior transporte y uso. La siguiente sección proporcionará una descripción detallada de los procedimientos adecuados para la preparación, almacenamiento y descongelación del plasma.

¿Qué es el plasma?

Definición básica

El plasma es el componente líquido de la sangre y es de color amarillo pálido. Es la fracción líquida que se obtiene centrifugando la sangre entera después de la anticoagulación para eliminar las células sanguíneas. El plasma representa aproximadamente entre el 55 % y el 60 % del volumen de la sangre total y es un componente importante del entorno interno del cuerpo.

Componentes principales del plasma

Aproximadamente el 90% del plasma es agua; el resto se compone de varios componentes sólidos disueltos en agua:

1. Proteínas plasmáticas: incluidas albúmina, globulinas y fibrinógeno.

   Albúmina: Mantiene la presión osmótica coloidal del plasma, evita que el líquido se escape de los vasos sanguíneos y mantiene un volumen sanguíneo estable.

   Globulinas: Participan en la defensa inmune del organismo; Los anticuerpos (inmunoglobulinas) que contienen pueden reconocer y neutralizar específicamente los patógenos.

   Fibrinógeno: proteína clave en el proceso de coagulación de la sangre; Bajo la acción de la trombina, se convierte en fibrina insoluble, formando un coágulo de sangre para detener el sangrado.

2. Electrolitos: iones de sodio, iones de potasio, iones de calcio, iones de cloruro, etc., que mantienen el equilibrio de la presión osmótica, la excitabilidad neuromuscular y el equilibrio ácido-base.

3. Nutrientes: Glucosa, aminoácidos, lípidos, vitaminas, etc.

4. Hormonas: actúan como moléculas de señalización para regular diversos procesos fisiológicos.

5. Productos de desecho metabólicos: urea, creatinina, ácido úrico, etc., transportados vía plasma a los órganos excretores.

Funciones del plasma

1. Transporte: suministra oxígeno, nutrientes y hormonas a los tejidos de todo el cuerpo, mientras transporta dióxido de carbono y productos de desecho metabólicos a los pulmones y riñones para su excreción.

2. Mantenimiento de la estabilidad del ambiente interno: Mantiene el equilibrio ácido-base en sangre a través de sistemas amortiguadores (bicarbonato, fosfato y proteínas); La presión osmótica coloidal formada por la albúmina mantiene el equilibrio de líquidos entre los espacios intravascular y extravascular.

3. Defensa inmune: las inmunoglobulinas (anticuerpos) reconocen y neutralizan los patógenos, formando una barrera de defensa inespecífica.

4. Coagulación sanguínea y hemostasia: bajo la acción de la trombina, el fibrinógeno se convierte en polímeros de fibrina, que atrapan las células sanguíneas para formar un coágulo. Al mismo tiempo, los sistemas anticoagulantes y fibrinolíticos previenen la formación excesiva de trombos y degradan los coágulos de fibrina una vez que se completa la hemostasia.

La diferencia entre plasma y suero

Plasma y suero son dos conceptos que suelen confundirse:

El plasma es el sobrenadante que se obtiene centrifugando la sangre completa después de la anticoagulación; contiene todos los factores de coagulación, incluido el fibrinógeno.

El suero es el líquido que se separa después de que la sangre se ha coagulado de forma natural; no contiene fibrinógeno ni ciertos factores de coagulación.

En las transfusiones de sangre clínicas se utilizan productos plasmáticos (como plasma fresco congelado). En algunas pruebas bioquímicas, el suero y el plasma se pueden utilizar indistintamente; sin embargo, se debe utilizar plasma para las pruebas de función de la coagulación.

Importancia clínica del plasma

El plasma en sí y sus componentes separados son productos sanguíneos importantes con aplicaciones generalizadas en la medicina clínica:

1. Plasma Fresco Congelado (PFC): Se utiliza para reponer los factores de coagulación y tratar trastornos de la coagulación, hemorragias masivas, enfermedades hepáticas, etc.

2. Crioprecipitado: Rico en factor VIII, vWF y fibrinógeno; utilizado para tratar la hemofilia A y la deficiencia de fibrinógeno

3. Albúmina humana: se utiliza para tratar la hipoproteinemia, quemaduras y ascitis asociadas con la cirrosis.

4. Inmunoglobulinas: utilizadas para tratar trastornos de inmunodeficiencia y enfermedades autoinmunes.

5. Intercambio de plasma: se utiliza para eliminar sustancias patógenas (como autoanticuerpos y toxinas) del torrente sanguíneo.

Comprender la definición básica, los componentes y las funciones del plasma es un requisito previo y una base para comprender las técnicas posteriores de criopreservación de plasma.

Proceso de preparación de plasma fresco congelado (FFP)

El plasma fresco congelado (PFC) es un producto sanguíneo que se prepara separando la sangre completa dentro de un período de tiempo específico después de su recolección y congelándola rápidamente. Contiene todos los factores de coagulación, incluidos los factores lábiles V y VIII.

Proceso de preparación estándar

Paso 1: extracción de sangre total

Recoja sangre completa utilizando bolsas de sangre que contengan anticoagulantes (CPD, CPDA-1) y colóquelas inmediatamente en un ambiente refrigerado a 4°C ± 2°C.

Paso 2: Centrifugación (que se completará entre 6 y 8 horas después de la extracción de sangre)

Someter la sangre entera a una centrifugación inicial de alta velocidad (5000 × g, 7 minutos) a 4°C ± 2°C. Utilice un separador de plasma para separar el plasma sobrenadante en una bolsa de transferencia y luego selle térmicamente el tubo de conexión. Dependiendo del conservante utilizado, este paso debe completarse en un plazo de 6 horas para el conservante ACD y en un plazo de 8 horas para los conservantes CPD o CPDA-1.

Paso 3: congelación rápida

Coloque las bolsas de plasma separadas en un congelador rápido de plasma y congélelas rápidamente hasta un estado sólido a -30 °C o menos. El tiempo de congelación debe mantenerse dentro de los 60 minutos para garantizar que se pase el menor tiempo posible en la zona de máxima formación de cristales de hielo. La congelación rápida es un paso crítico para preservar la actividad de los factores de coagulación.

Paso 4: almacenamiento a largo plazo

Transfiera el plasma congelado instantáneamente a un congelador de plasma ajustado a -20 °C o menos. La vida útil es de 1 año a partir de la fecha de recogida. Una vez transcurrido este período, el plasma se convierte automáticamente en plasma congelado (FP) estándar, con una vida útil ampliada a 4 años.

Tipos de plasma

¿Cómo se almacena el plasma?

1. Temperatura

   Plasma fresco congelado (FFP): ≤ -20°C (recomendado: -30°C), Vida útil: 1 año

   Plasma congelado (FP): ≤ -18°C, Vida útil: 4 años

   Factores de coagulación del crioprecipitado: ≤ -18°C, Vida útil: 1 año

2. Almacenamiento categorizado y zonificado: los productos calificados, los productos en espera de prueba y los productos no conformes deben almacenarse en zonas separadas y etiquetarse claramente. El plasma no conforme debe aislarse físicamente para evitar una liberación accidental del almacén.

3. Evite la congelación y descongelación repetidas: una vez descongelado, el plasma no debe volverse a congelar bajo ninguna circunstancia. La congelación y descongelación repetidas provocan una disminución progresiva de la actividad del factor de coagulación, la desnaturalización de las proteínas y un mayor riesgo de contaminación microbiana.

4. Monitoreo de temperatura: Se deben instalar registradores automáticos de temperatura en instalaciones de almacenamiento y cámaras frigoríficas de congelación rápida. Se deberán prever dispositivos de alarma de anomalías de temperatura. Los puntos de medición deben instalarse a una altura no inferior a dos tercios de la altura de la chimenea de plasma.

5. Integridad del embalaje: las bolsas de plasma deben estar libres de daños y fugas, y la información de la etiqueta debe ser completa y rastreable.

El efecto de la temperatura de almacenamiento en las muestras de plasma

La investigación en criobiología ha demostrado que en condiciones de baja temperatura, la velocidad de las reacciones bioquímicas en las células vivas disminuye significativamente. A temperaturas inferiores a -20°C, la actividad de la mayoría de las enzimas se inhibe y el crecimiento microbiano prácticamente cesa. Sin embargo, dado que el agua es el componente principal del plasma (representa aproximadamente el 95%), los métodos de congelación inadecuados pueden conducir fácilmente a la formación de cristales de hielo, que dañan las estructuras de las proteínas y provocan la inactivación de los factores de coagulación.

Características de almacenamiento a diferentes rangos de temperatura:

1. 2–8°C Refrigeración: Ligeramente por encima del punto de congelación; No presenta daños por congelación del agua, pero no es apto para almacenamiento a largo plazo.

2. -20°C Congelación: Por debajo del punto de congelación; esta es la zona donde cristaliza el agua; Las muestras deben pasar rápidamente por este rango de temperatura para minimizar el daño de los cristales de hielo.

3. -80°C Temperatura ultrabaja: Las reacciones bioquímicas son extremadamente lentas; adecuado para almacenamiento a medio y largo plazo

4. -196°C nitrógeno líquido: la actividad metabólica cesa casi por completo, lo que permite el almacenamiento a largo plazo

Ventajas de la caja de almacenamiento de congelación rápida de plasma para almacenamiento

Caja de almacenamiento de congelación rápida de plasma Capacidad: 425; 585; 860 Rango de temperatura: -40 a -86 °C Sensor: PT1000 Controlador de temperatura: electrónico Modo de enfriamiento: aire forzado

1. Congela rápidamente el plasma para ayudar a preservar la actividad del factor de coagulación y mantener la calidad del plasma.

2. Proporciona temperaturas estables de hasta -86 °C para congelación y conservación del plasma a largo plazo.

3. Garantiza una refrigeración uniforme y condiciones de almacenamiento consistentes en toda la cámara.

4. El aislamiento VIP minimiza las fluctuaciones de temperatura y mejora la eficiencia energética.

5. Adecuado para centros de sangre, departamentos de transfusión, biobancos y laboratorios de investigación.

6. Equipado con múltiples alarmas y sistemas de protección para salvaguardar valiosas muestras de plasma.

¿Cómo descongelar muestras y bolsas de plasma?

La descongelación del plasma es un paso crítico en la transfusión clínica y el análisis de laboratorio; una manipulación inadecuada puede conducir directamente a la inactivación de los factores de coagulación.

Procedimiento:

1. Preparación: Precalentar el baño maría a temperatura constante a 37°C (debe calibrarse con un termómetro; no confiar en conjeturas).

2. Protección: Coloque una bolsa protectora sobre la bolsa de plasma para evitar que el agua entre en contacto con el puerto de transfusión.

3. Descongelación: Sumerja completamente la bolsa de plasma en el baño de agua a 37°C, agitándola suavemente y continuamente para asegurar un calentamiento uniforme.

4. Control de tiempo: Aproximadamente 10 a 20 minutos para una bolsa de plasma de 200 ml; aproximadamente 10 minutos para factores de coagulación crioprecipitados

5. Manipulación posterior a la descongelación: almacenar inmediatamente en un refrigerador a 2–6°C y completar la transfusión dentro de las 24 horas (dentro de las 4–6 horas para el crioprecipitado).

Nota:

Una vez descongelado, el PFC debe conservarse a una temperatura de entre 2 y 6 °C y administrarse en un plazo de 24 horas. Los estudios han demostrado que, en comparación con el día 5 después de la descongelación, la generación de trombina se reduce en un 40 % el día 0 y los niveles de factores de coagulación (V, VII, VIII, vWF y proteína S libre) disminuyen en aproximadamente un 30 %.

Factores a considerar al seleccionar un congelador de plasma

1. Rendimiento de temperatura

   Rango de temperatura: Ajustable de -20°C a -30°C

   Uniformidad de temperatura: diferencia de temperatura en varios puntos dentro de la cámara ≤ ±2°C

   Estabilidad de temperatura: Fluctuación ≤ ±1°C

   Tiempo de recuperación de la puerta: vuelve a la temperatura establecida en ≤ 5 minutos

2. Capacidad de congelación

   Capacidad de congelación rápida: Número de bolsas de plasma que se pueden procesar en un solo lote (p. ej., 20 bolsas/lote)

   Tiempo de congelación: tiempo necesario para que la temperatura central del plasma baje de la temperatura ambiente a -30 °C (debe ser ≤ 60 minutos)

   Tiempo de enfriamiento sin carga: tiempo requerido para que la unidad se enfríe desde la temperatura ambiente hasta la temperatura de funcionamiento

3. Cumplimiento y Certificaciones

   Al seleccionar un congelador de plasma, es fundamental verificar que la unidad cumpla con los siguientes estándares:

   AABB

   ANRC

   Certificación de dispositivo médico FDA Clase II

   MDD 93/42/CEE Clase IIa

4. Monitoreo y Gestión de Datos

   Registro de temperatura: registrador de datos incorporado compatible con USB o exportación de red

   Sistema de alarma: alarmas de varios niveles para temperatura fuera de rango, tiempo de espera de apertura de puerta, corte de energía y más

   Monitoreo remoto: admite conectividad inalámbrica con notificaciones push en tiempo real para anomalías

   Integración LIMS: interactúa con el sistema de gestión de información de laboratorio (LIMS) para permitir la trazabilidad de un extremo a otro

Conclusión

La caja de almacenamiento de congelación rápida de plasma es un componente central del sistema de cadena de frío de la sangre y su rendimiento afecta directamente la seguridad y eficacia clínica de los componentes sanguíneos. Desde la refrigeración básica por plasma hasta la congelación rápida y la descongelación especializada, diferentes tipos de equipos desempeñan funciones fundamentales en cada etapa.

Como marca especializada en soluciones de cadena de frío médica y de laboratorio, Scitek ofrece una amplia gama de equipos para almacenamiento, congelación y descongelación rápida de plasma, lo que ayuda a los laboratorios y centros de sangre a lograr una gestión de muestras de sangre más estable y eficiente.