Pipetas: principios, componentes, tipos, funcionamiento

Definición de pipetas: una pipeta es un equipo de laboratorio que se utiliza para medir o dispensar pequeñas cantidades de líquido en volúmenes de mililitros (mL) o microlitros (μL).

Hay tres tipos básicos de pipetas: de vidrio, de plástico y eléctricas. Normalmente, las pipetas eléctricas se utilizan para una amplia variedad de procedimientos experimentales en química, biología molecular, investigación médica y más. En la siguiente sección, describiremos cómo funcionan las pipetas, cómo están construidas y de qué tipos son.

Principio de pipeta

El principio de funcionamiento de las pipetas se basa en dos mecanismos principales, el método de desplazamiento de aire y el método de desplazamiento positivo. Cada tipo de pipeta tiene un pistón que se mueve dentro de un tubo capilar o cilindro. En las pipetas de escape se deja una cierta cantidad de aire entre el pistón y el líquido. En el pipeteo volumétrico, el pistón está en contacto directo con el fluido.

• Método de escape: el movimiento telescópico de un resorte hace que el pistón aspire y expulse líquido. En respuesta al empuje del pistón, se libera algo de aire y el fluido es aspirado por la presión atmosférica, después de lo cual se presiona el aire para liberar el fluido. Por tanto, es posible controlar la velocidad y la fuerza del pipeteo mientras se utiliza una pipeta, ya que funciona utilizando las propiedades de expansión y contracción de un resorte. Se utiliza principalmente en pipetas.

• Pipetas volumétricas: las pipetas repetitivas o las pipetas volumétricas especializadas suelen utilizar el principio volumétrico. El contacto directo con el líquido se consigue mediante un pistón desechable que se mueve dentro de la punta. Luego, la muestra se introduce en la punta mediante el movimiento ascendente del pistón (no hay colchón de aire como en las pipetas de escape). A medida que el pistón desciende, se descarga el volumen seleccionado.

Componentes principales de las pipetas:

1. Émbolo: Se utiliza para aspirar y dispensar el volumen de líquido deseado.

2. Botón de expulsión: Hace que la barra de metal caiga y expulse la punta de la pipeta.

3. Perilla de ajuste de volumen: el volumen de la muestra a transferir se puede configurar girando la perilla de ajuste de volumen para aumentar y disminuir la concentración. No se puede girar en pipetas de volumen fijo.

4. Ventana de volumen: muestra el volumen establecido; el valor de posición mostrado depende del tamaño de la pipeta.

5. Eje: Es una estructura en forma de tubo llena de aire en una pipeta de escape. Cuando se presiona el pistón hacia abajo, se libera algo de aire del eje, lo que ayuda a la aspiración de líquido. Por el contrario, soltar el pistón ayuda a dispensar líquido mientras se rellena el eje con aire.

6. Cono de punta: esta es el área donde se coloca la punta de la pipeta.

7. Punta de pipeta: Es un implemento fabricado en polipropileno o plástico, moldeado y en contacto con el líquido.

Tipos de pipeta

Pipetas monocanal frente a pipetas multicanal

Una pipeta monocanal es un instrumento no desechable con un diseño exhaustivo que produce mediciones precisas utilizando una única punta desechable. Las pipetas multicanal son comparables a las pipetas monocanal, excepto que pueden alojar varias puntas al mismo tiempo. El líquido se extrae del mismo pozo hacia diferentes canales simultáneamente.

Se encuentran disponibles pipetas monocanal manuales y motorizadas de volumen variable y volumen fijo, siendo la manual el diseño más económico y tradicional. Por el contrario, las micropipetas electrónicas son caras pero ofrecen varias ventajas, como una ergonomía mejorada, menos variación por parte del usuario y mayor exactitud y precisión.

Pipetas manuales versus motorizadas

Mientras que las pipetas manuales utilizan la acción mecánica del pulgar para mover el pistón (hasta 3 cm), las pipetas motorizadas están diseñadas para mejorar la ergonomía reduciendo la fuerza necesaria.

Pipetas de volumen fijo versus pipetas de volumen ajustable

Las pipetas de rango fijo son las más adecuadas para manipular líquidos espesos o viscosos. Los rangos de pipeta no se pueden cambiar en pipetas de volumen fijo, lo que facilita una operación más rápida para el usuario.

Micropipetas

Las micropipetas son esenciales en biología molecular y laboratorios médicos, ya que permiten el manejo de alta precisión de volúmenes de líquido extremadamente pequeños.

Cómo reemplazar los accesorios de la pipeta

Manejo de pipetas

1. Cargue la punta en la pipeta y retírela de la caja de puntas.

2. Usando la perilla de ajuste de volumen, ajuste el volumen a transmitir.

3. Mientras mantiene un agarre vertical sobre la pipeta, presione el émbolo hasta la primera posición.

4. Coloque la punta en el componente líquido del que se está tomando la muestra.

5. Con la punta aún sumergida, suelte lentamente el émbolo para aspirar el líquido. Si el líquido es viscoso hacer una pausa al final.

6. Coloque la punta de la pipeta dentro del tubo o recipiente en el que se recogió el líquido.

7. Presione completamente el émbolo hasta que se detenga en el segundo tope y llene el tubo correspondiente con líquido.

8. Presione el botón de expulsión para retirar la punta usada y colocarla en el bote de basura correspondiente.

¿Para qué se utiliza una pipeta?

Facilita la distribución uniforme de las células en la inoculación celular y evita la formación de espuma y burbujas.

Facilita el intercambio de medios de cultivos de células en botella T, mantiene la esterilidad del cultivo y previene la contaminación.

La placa de microtitulación de 96 pocillos se utiliza habitualmente para aplicaciones de placas de microtitulación como ELISA, PCR o cultivo celular, y es compatible con variantes de pipetas multicanal de 8 o 12 canales.

Las pipetas serológicas se utilizan en entornos de laboratorio rutinarios y en aplicaciones que implican cultivo de células y tejidos.

Conclusión

Desde la pipeta más simple con bulbo de vidrio hasta las pipetas electrónicas actuales, la evolución de las herramientas de pipeteo siempre ha girado en torno a un único objetivo central: la transferencia precisa y confiable de microvolúmenes de líquido. Comprender cómo funcionan, sus componentes principales y las diferencias entre los distintos tipos nos ayuda a seleccionar la herramienta adecuada para nuestros experimentos. Dominar las técnicas operativas correctas, como el pipeteo directo, el pipeteo inverso, la profundidad de inmersión de la punta y la velocidad, es clave para garantizar resultados precisos. Sin embargo, incluso las mejores pipetas requieren calibración y mantenimiento regulares. Las inspecciones, la limpieza y el mantenimiento de rutina no solo extienden la vida útil del instrumento sino que también garantizan la autenticidad y confiabilidad de los datos experimentales. En los laboratorios actuales, las pipetas ya no son simplemente 'herramientas de transferencia de líquidos'; sirven como puentes precisos que conectan ideas experimentales con resultados científicos. Sólo comprendiendo los principios, realizando las operaciones correctamente y manteniendo el equipo adecuadamente podrá esta pequeña pipeta alcanzar realmente todo su potencial.